Отчет об исследовании функционального вещества
CELABIO®-F – это ферментированный препарат
растительного происхождения, сопоставимый по своему действию с
плацентой
*1 Масанори Мураками, *1 Тоcитака Окада
*1 ойо Хакко Ко., Лтд. (Toyo Hakko Co., Ltd.) 1-39-1 Есикава-тё, г. Обу, префектура Айти, Япония
Адрес электронной почты: toshitaka_okada@toyohakko.co.jp
КРАТКИЕ СВЕДЕНИЯ
В современном обществе у пожилых людей все сильнее ощущается потребность в безопасных
продуктах с антивозрастным эффектом, ориентированных на сохранение здоровья. Одним из
материалов, отвечающих этому условию, является плацента. Она широко используется для
изготовления многих препаратов.
С учетом общественной тенденции на применение более безопасных материалов растительного
происхождения, по своему действию сопоставимых с плацентой, мы занялись поиском новых
материалов и обнаружили, что смесь экстракта рисовых отрубей и экстракта соевых бобов,
ферментированная бактерией Bacillus subtilis var natío, обладает множеством функций, сходных с
плацентой. В связи с этим мы разрабатывали его в качестве функционального пищевого вещества
(торговое наименование: CELABIO®-F).
В ходе испытаний с приемом препарата CELABIO®-F внутрь было подтверждено, что материал
оказывает косметическое действие, уменьшает жалобы на климактерические симптомы, улучшает
кровоток, снижает оксидативный стресс в организме, снимает усталость, улучшает функцию
печени, снижает уровень триглицеридов в крови и пр.
Введение
Плацента – это орган млекопитающего, который соединяет развивающийся плод со стенкой
матки, обеспечивая всасывание питательных веществ, терморегуляцию, выведение отходов и
газообмен через кровеносную систему матери во время беременности. Она богата аминокислотами,
витаминами, минералами, а также белками, липидами и сахаридами.
В основном экстракт плаценты широко используется в фармацевтике, пищевой продукции типа
пищевых добавок и напитков, а также в косметике.
В последние годы отмечается рост продаж продуктов с содержанием экстракта плаценты. Именно
за счет существования фактора пролиферации клеток растет его применение в пищевых добавках и
косметике в качестве антивозрастного средства.
Признается не только его косметический эффект, но и множество других функций, получены
результаты исследований, свидетельствующие, что он облегчает проявление климактерических
симптомов, улучшает функцию печени и пр.1)-12).
Раньше в пищевой и косметической промышленности широко использовался экстракт плаценты
коров, однако в связи с проблемой ГЭКРС (губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота)
практически повсеместно стали использовать плаценту свиного или лошадиного происхождения.
В связи с наметившейся тенденцией к повышению безопасности на рынке появились похожие на
плаценту ингредиенты из морских организмов, например мембрана яичников лосося, и/или из
плаценты цветущих растений, таких как дыня и роза13).
При производстве лекарственных препаратов используется плацента только человеческого
происхождения.
Учитывая вышеизложенную социальную ситуацию, нами был разработан новый
плацентоподобный материал для пищевого применения – смесь экстракта рисовых отрубей и
экстракта соевых бобов, ферментированная бактерией Bacillus subtilis var. natto (торговое
наименование: CELABIO®-F).
Далее приводится подтвержденное действие CELABIO®-F при пероральном приеме, а именно
улучшение внешнего вида, уменьшение жалоб на климактерические симптомы, улучшение
кровотока, снижение оксидативного стресса, снятие усталости, улучшение функции печени и пр.
1. CELABIO®-F, смесь экстракта рисовых отрубей и экстракта соевых бобов,
ферментированная бактерией Bacillus subtilis var. natto
CELABIO®-F представляет собой порошок, полученный путем фильтрации смеси экстракта
рисовых отрубей и экстракта соевых бобов, ферментированной бактерией Bacillus subtilis var.
natto, с последующим добавлением декстрина.
Порошок содержит ферментированный материал в соотношении 20% на твердое вещество.
2. Косметический эффект
2.1. Активизация фибробластов
Нормальные фибробласты человека инокулировали на микропланшет и инкубировали в
течение 24 часов. Затем используемую среду заменяли на среду с содержанием CELABIO®F
и дополнительно инкубировали в течение 48 часов. Далее подсчитывали количество клеток с
помощью МТТ-теста.
В результате было подтверждено, что CELABIO®-F оказывает на клетки активирующее
действие, превосходящее по своей силе эффект от экстракта плаценты свиньи (содержание
твердых веществ: 33%), при более низкой концентрации (рис. 1).
Рис.1. Активизация фибробластов
2.2. Активизация выработки коллагена человека типа I
Нормальные фибробласты человека инокулировали на микропланшет и инкубировали в
течение 24 часов. Затем среду заменяли на среду, содержащую CELABIO®-F, и инкубировали
еще 72 часа.
Впоследствии количество коллагена в
супернатанте инкубируемой среды определяли с помощью набора для иммуноферментного
анализа содержания коллагена человека типа I (Human collagen, Type I, ELISA Kit).
Было подтверждено, что CELABIO®-F демонстрирует более высокую статистически
значимую активность выработки коллагена по сравнению с контролем (рис. 2).
Рис. 2 Активизация выработки коллагена человека типа I
2.3. Активизация выработки гиалуроновой кислоты
Нормальные фибробласты человека инокулировали на микропланшет и инкубировали в
течение 24 часов.
Затем среду заменяли на среду, содержащую CELABIO®-F, и инкубировали еще 72 часа. В
дальнейшем количество гиалуроновой кислоты в супернатанте инкубируемой среды
определяли с помощью набора для иммуноферментного анализа содержания гиалуроновой
кислоты (Hyaluronan DuoSet, ELISA).
Было подтверждено, что препарат CELABIO®-F демонстрирует более высокую статистически
значимую активность по стимулированию выработки гиалуроновой кислоты по сравнению с
контролем (рис. 3).
Рис. 3 Активизация выработки гиалуроновой кислоты
2.4. Улучшение состояния кожи при пероральном приеме (1)
Испытуемые – 13 здоровых взрослых человек обоих полов (в возрасте 20-50 лет).
Испытуемые принимали по 500 мг CELABIO®-F ежедневно в течение 28 дней. У них
оценивали изменение содержания влаги и эластичности кожи на лице в области щек до и после
приема препарата.
Диагностика кожи проводилась с помощью прибора CYBER SKIN CHECKER PT
производства компании JAPAN GALS Co. Ltd.
При постоянном приеме CELABIO®-F наблюдалось повышение содержания влаги и
эластичности кожи. По результатам анкетирования, 77% испытуемых отметили улучшение
состояния кожи (рис. 4,5).
Рис.4 Изменение содержания влаги и эластичности кожи (щека) Рис.5 Улучшение состояния кожи, отмечаемое испытуемыми
Примеры улучшения состояния кожи на снимках под микроскопом приводятся на рис. 6. До
приема препарата наблюдались участки кожи, на которых не видно бороздок (cristae cutis) и
гребешков (sulci cutis). После приема препарата рисунок кожи был отчетливо виден, что
является доказательством улучшения текстуры.
Рис.6 Изображения кожи (щеки) под микроскопом:
улучшенное изображение
2.5. Улучшение состояния кожи при пероральном приеме (2)
Испытуемые – 8 здоровых взрослых человек обоих полов (в возрасте 30-50 лет).
Испытуемые принимали по 495 мг CELABIO®-F ежедневно в течение 28 дней. У них
оценивали изменение состояния кожи на лице до и после приема препарата.
Состояние кожи оценивали с помощью оборудования для анализа изображения кожи VISIA®
производства компании Integral Corporation. Результат сравнивали с итоговым баллом с правой
и левой стороны лица.
При постоянном приеме CELABIO®-F наблюдалось значительное улучшение и/или
тенденция к улучшению вида пигментных пятен коричневого цвета (по меламину), пор,
текстуры кожи и пигментных пятен (по ультрафиолетовому излучению) (рис. 7).
Рис. 7 Изменение состояния кожи
3. Уменьшение жалоб на климактерические симптомы
В качестве испытуемых были отобраны 13 японок с жалобами на климактерические симптомы
и относительно высоким показателем по менопаузальному индексу Куппермана по итогам
медицинского опроса.
Испытуемые принимали по 495 мг CELABIO®-F ежедневно в течение 8 недель. У них
сравнивали изменения менопаузального индекса Куппермана до приема препарата и спустя 4
и 8 недель его приема.
Спустя 4 или 8 недель приема CELABIO®-F наблюдалось статистически значимое снижение
итогового балла по менопаузальному индексу Куппермана по степени тяжести с «тяжелой»
(35 и более) до приема препарата до «умеренной» (21-34) и «слабо выраженной» (16-20), что
подтверждало облегчение проявлений климактерических симптомов (рис. 8).
Рис. 8 Менопаузальный индекс Куппермана
Со временем было отмечено статистически значимое улучшение по всем
симптомокомплексам (вазомоторные нарушения, сенсорные нарушения, бессонница,
нервозность, депрессия, головокружение, общее недомогание, артралгия/боль в мышцах,
головная боль, учащенный пульс, формикация) (таблица 1).
4. Улучшение кровообращения
Испытуемые – 8 здоровых взрослых человек обоих полов (в возрасте 20-50 лет).
Испытуемые принимали по 495 мг CELABIO®-F ежедневно в течение одной недели. После
этого у них оценивали изменение состояния кожи до и после приема препарата.
Работу периферического кровообращения проверяли с помощью прибора Blood Circulation
Checker, а волновой спектр пересчитывали в баллы для оценки.
Одновременно измеряли артериальное давление.
Тенденция к улучшению периферического кровообращения была отмечена через час после
однократного приема препарата. Затем было отмечено статистически значимое улучшение
после недельного приема (рис. 9). Касаемо артериального давления, систолическое
артериальное давление демонстрировало тенденцию к снижению через час после
однократного приема препарата, а после недельного приема препарата оно снижалось до
статистически значимого нормального диапазона (рис. 10).
5. Снятие усталости
Испытуемые – 10 здоровых студентов мужского пола (все – спортсмены).
За час до исследования испытуемые принимали 10 г CELABIO®-F, смешанного с
безалкогольным напитком. После чего проводили велоэргометрию при допустимой
физической нагрузке (масса тела х 7,5%).
Испытание на переносимость физической нагрузки проводили следующим образом: (10
секунд вращения педалей на максимальной скорости, затем 50 секунд отдыха) x 30
повторений.
Позже, в качестве контроля, аналогичным образом проводили тест на переносимость
физической нагрузки после приема только безалкогольного напитка без добавления
CELABIO®-F.
До и после испытания на переносимость физической нагрузки измеряли концентрацию
лактата в крови.
При приеме CELABIO®-F, начиная с 10 минуты после начала испытания на переносимость
физической нагрузки, наблюдалось подавление снижения энергии, а затем повышение
физической работоспособности по сравнению с контролем (рис. 11).
Наблюдалась тенденция к снижению концентрации лактата в крови при приеме CELABIO®F
по сравнению с контролем (рис. 12).
6. Снижение оксидативного стресса и уровня триглицеридов in vivo
Испытуемые – 18 здоровых взрослых человек обоих полов (в возрасте 20-60 лет).
Испытуемые принимали по 479 мг CELABIO®-F ежедневно в течение 12 недель. После этого
оценивали оба эффекта до и после приема препарата.
В качестве биомаркеров оксидативного стресса определяли содержание в крови 8-OHdG
(8гидроксидезоксигуанозина) и карбонилированного белка.
Спустя 4 недели непрерывного приема CELABIO®-F концентрации 8-OHdG и
карбонилированного белка в крови демонстрировали статистически значимое снижение, что
свидетельствовало о подавлении оксидативного стресса in vivo (рис. 13-14).
Кроме того, при пероральном приеме был отмечен эффект снижения уровня триглицеридов в
крови. Снижение было отмечено на 8-й неделе приема, а статистически значимое снижение
было подтверждено на 12-й неделе приема (рис. 15).
Рис. 15 Изменение концентрации триглицеридов в крови
7. Улучшение функции печени (эффект ускорения метаболизма ацетальдегида)
7.1. Испытание in vitro с использованием линии клеток печени человека
В качестве линии клеток печени человека использовали клетки линии Chang liver.
К раствору культуральной среды клеток линии Chang liver добавляли 1) смесь экстракта
рисовых отрубей и экстракта соевых бобов, 2) смесь экстракта рисовых отрубей и экстракта
соевых бобов, ферментированных бактерией Bacillus subtilis var natto, 3) куркумин (10 мг/мл),
4) аланин (10 мг/мл), 5) орнитин (10 мг/мл) или 6) глутатион (5 мг/мл) при двукратном
последовательном разведении. После добавления растворы выдерживали в течение часа, а
затем определяли активность альдегиддегидрогеназы.
У смеси 2) экстракта рисовых отрубей и экстракта соевых бобов, ферментированной
бактерией Bacillus subtilis var natto, отмечался очень высокий эффект стимуляции активности
альдегиддегидрогеназы. Ферментация усилила активность, которая оказалась сильнее, чем у
куркумина – действующего компонента куркумы (рис. 16).
Рис. 16 Активизация альдегиддегидрогеназы в клетках линии Chang liver
7.2. Улучшение функции печени у человека при пероральном приеме (1)
Двое испытуемых здоровых мужчин выпивали воду, напиток с содержанием куркумы
(эквивалентно 30 мг куркумина), и 100 мл 5%-го водного раствора CELABIO®-F.
Через 30 минут после приема давали выпить 700 мл пива (содержание алкоголя: 5%) в течение
30 минут и определяли концентрацию ацетальдегида в слюне через 1, 3 и 5 часов.
Изменение концентрации ацетальдегида с течением времени продемонстрировало ускорение
метаболизма ацетальдегида, образующегося после приема алкоголя, под действием
CELABIO®-F (рис. 17).
Рис. 17 Ускорение метаболизма ацетальдегида
7.3. Улучшение функции печени у человека при пероральном приеме (2)
Испытуемые – 13 здоровых взрослых мужчин.
Методика испытаний была полностью аналогична методике исследования 7-2 «Улучшение
функции печени человека при пероральном приеме (1)», а эффект оценивали по концентрации
ацетальдегида в слюне.
Распределение по группам соответствовало таблице 2. Каждое испытуемое вещество запивали
100 мл воды.
Данное испытание проводилось методом перекрестного анализа с участием каждого
испытуемого в нескольких тестовых группах.
Было доказано, что прием CELABIO®-F отдельно или одновременно с куркумином
способствует ускорению метаболизма ацетальдегида. В связи с этим улучшение функции
печени может быть более выраженным по сравнению с другими веществами, которые
потенциально обладают таким же эффектом (рис. 18).
Рис. 18 Активизация метаболизма ацетальдегида
Полученные к настоящему времени данные свидетельствуют о возможности предотвращения
«похмелья» при приеме CELABIO®-F.
8. Заключение
Сообщается, что экстракт плаценты эффективен в качестве ингредиента косметических
средств для улучшения текстуры, сужения пор и устранения покраснений, а также обладает
потенциалом для лечения кожных воспалений, подавления образования меланина, а также
стимулирования обновления клеток кожи.
Кроме того, при использовании в составе продуктов для здорового питания плацента обладает
потенциалом для облегчения климактерических симптомов, активизации функции печени,
снятия усталости и обогащения рациона питательными веществами.
В современном обществе пожилые люди все больше заботятся о своем здоровье. Особенно
востребованы продукты с подчеркнутым «антивозрастным эффектом».
В связи с этим, экстракт плаценты, благодаря своим многочисленным положительным
свойствам, широко используется в качестве антивозрастного ингредиента при производстве
косметики и продуктов для здорового питания, а продажи продукции с его содержанием
демонстрируют устойчивый рост.
Раньше в пищевой и косметической промышленности использовался экстракт плаценты
коров. Однако с тех пор, как было установлено, что губчатая энцефалопатия крупного рогатого
скота (ГЭКРС) представляет собой смертельное нейродегенеративное заболевание крупного
рогатого скота, которое может передаваться человеку после употребления зараженного мяса,
в производстве стали использовать экстракт плаценты других домашних животных, кроме
коров. Коза относится к жвачным животным, поэтому, как и в случае с ГЭКРС, использование
экстракта ее плаценты также вызывает опасения по поводу развития нейродегенеративных
заболеваний у человека.
В связи с этим в настоящее время используются экстракты плаценты свиного и лошадиного
происхождения. Однако растет потребность в более безопасных плацентоподобных
материалах, обладающих функциями, аналогичными экстракту плаценты животных.
Представленный нами препарат CELABIO®-F представляет собой смесь экстракта рисовых
отрубей и экстракта соевых бобов, ферментированных бактерией Bacillus subtilis var. natto, и
обладает следующими функциями, аналогичными эффекту плаценты животного
происхождения: косметическое действие (патентная заявка), уменьшение жалоб на
климактерические симптомы (патентная заявка), улучшение кровотока, снижение
оксидативного стресса в организме, снятие усталости (патент № 5855357), улучшение
функции печени и пр. Его можно рассматривать как безопасное плацентоподобное вещество
растительного происхождения, которое отвечает современным тенденциям использования
безопасных материалов.
Поскольку различные функциональные оценки препарата CELABIO®-F, представленные в
настоящем документе, проводились в экспериментальном масштабе, а действующие
компоненты и механизм их действия неизвестны, планируется провести дальнейшее
детальное исследование.
Список литературы
1) Yoshikawa C,Koike K,Takano F,et al. : Climacteric, 17,370(2014)
2) Hong KB, Park Y, Kim JH, et al. : Korean J. Food Sei. Anim. Resour.,35,413(2015)
3) Mikako Sato : Food Style 21,10,67(2006)
4) Koike K, Yamamoto Y, Suzuki N, et al. : Climacteric,15,30(2012)
5) Koike K, Yamamoto Y, Suzuki N, et al. : Climacteric, 16,28(2013)
6) Koike K, Yamamoto Y, Suzuki N, et al. : Climacteric, 16,447(2013)
7) Yosuke Karasawa, Yoshio Iwasaki, Shigeru Kagawa and others : Clinical Pharmacology and
Therapy,9,1093 (1981)
8) Han NR, Park CL, Kim NR, et al. : Reproduction,150,173(2015)
9) Tamotsu Emizu, Tomiko Hirose, Yuka Kano and others : Journal of New Remedies & Clinics,60,
1910(2011)
10) Togashi S, Takahashi N, Kubo Y, et al. : J. Health Sei.,46,117(2000)
11) Togashi S, Takahashi N, Watanabe S, et al. : J. Health Sei.,46,126(2000)
12) Liu KX, Kato Y, Kaku TI, et al. : J. Pharmacol .Exp. Then,294,510(2000) 13) Chieko Katsumi :
Fragrance Journal,45(4),35(2017)